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    ELISA试剂盒实验血清为何要稀释以及步骤

    点击次数:86   发布时间:2019/7/31 9:01:32

     每一盒elisa试剂盒里边都有一份对应的阐明书,而每一份阐明书里都会有写样本和稀释液的稀释份额,为何样本都需求稀释呢?今天的文章中,上海恒远生物科技有限公司将为您剖析:为何ELISA试验血清样本都需求稀释?

     
     
        在ELISA试剂盒试验血清为何要稀释?有两个原因:
     
     
        1.竞赛按捺对比显着,应稀释竞赛物;
     
     
        2.以下降非特异性反响,使特异性的抗原抗体反响充分体现出来。
    血清稀释用通常的PBS即可,可加1%的BSA,能有用下降ELISA本底,当然假如你嫌费事我觉得用生理盐水代替PBS也不大。不论你是用直接竞赛还是直接竞赛,血清的稀释倍数必定要事前确定,但也不必一点点,你做一个预试验即可,挑选OD在1.0左右的稀释倍数,即你的ELISA中阴性孔OD在1.0,这么作出来的曲线对比灵敏。
     
     
        ELISA试剂盒试验稀释血清的步骤:
     
     
        1、先把蛋白稀释一定的倍数,比如说10倍、20倍稀释(这样可以大体确定一个参数),将抗原进行一系列稀释包被微量反应板
     
     
        2、再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。
     
        上海恒远生物科技有限公司由资深专家带头组建研发团队,十几年ELISA试剂盒开发经验,品质保障,值得信赖;BIM品牌试剂盒更是知名度高,已被国内重点实验室广泛使用,如北京生命科学研究所,中国科学院,协和医科大学等;诸多国际权威刊物的文章广泛引用,如Nature, PNAS, Cell Research, Biomaterials等,目前SCI文章及国内核心期刊引用已达数百篇。专业技术团队提供完备的售前及售后服务,确保您实验成功!

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